Kit de recompte de cèl·lules-8 Plus

Aquest kit utilitza un compost WST-8, que es pot reduir per la deshidrogenasa per formar un compost de formaldehid taronja soluble en aigua als mitocondris, i el pic d'absorció màxim és de 450 nm. La producció de formaldehid és proporcional al nombre de cèl·lules vives, és a dir, com més cèl·lules vives, més fosc és el color; Com més gran sigui la citotoxicitat, més clar serà el color. Per a les mateixes cel·les, hi ha una relació lineal entre la profunditat del color i el nombre de cel·les.

El kit de recompte de cèl·lules{{0}} Plus(CCK-8 Plus), està optimitzat sobre la base dels kits CCK-8 convencionals i només triga de 0,5 a 1 hora a completar la detecció, amb detecció més ràpida, major sensibilitat i rang lineal més ampli.

Vaixell amb gel humit; emmagatzemar a 2-8 graus a la foscor fins a 12 mesos i a -20 graus fins a 24 mesos.

Assaig de proliferació cel·lular-viabilitat-toxicitat

(1) En una placa de 96-pou, planteu una certa quantitat de 100 µL de suspensió cel·lular i precultiveu-la en una incubadora (37 graus, 5% CO2) durant 24 hores.

(2) Afegiu 10 µL de diferents concentracions dels compostos de prova a la placa de cultiu. Incubar durant un període de temps adequat (per exemple: 6, 12, 24, 48 o 72 hores).

(3) Afegiu 10 µL de CCK-8 més solució a cada pou (aneu amb compte de no crear bombolles d'aire als pous, que afectaran la lectura de DO).

Nota: si els compostos de prova són oxidatius o reductors, l'efecte del fàrmac es pot eliminar substituint el medi per mitjà nou abans d'afegir CCK-8.

(4) Incubeu la placa a la incubadora durant 0.5-2 hores.

(5) Mesureu l'absorbància a 450 nm amb un lector de microplaques. (les longituds d'ona superiors a 600 nm, com ara 650 nm, es poden utilitzar com a longitud d'ona de referència per a la determinació de la longitud d'ona dual).

(6) Si el valor OD no s'ha de mesurar temporalment, podeu afegir 10 µL de solució de HCl 0,1 M o SDS a l'1% (W/V) a cada pou, i cobrir la placa de cultiu i emmagatzemar-la. a temperatura ambient a la foscor. L'absorbància no canvia en 24 hores.

Càlcul de la vitalitat

Viabilitat cel·lular (%)=[A (dosificada)-A (en blanc)]/[A (control)-A (en blanc)]×100%

Viabilitat citotòxica (%)=[A (control)-A (dosificada)]/[A (control)-A (blanc)]×100%

A (dosificada): absorció de pous amb cèl·lules, solució de CCK-8 més i solució de fàrmac

A (blanc): absorbància de pous amb medi i solució CCK-8 més sense cèl·lules

A (control): absorció de pous amb cèl·lules, CCK-8 més solució i cap solució de fàrmac

1. Aquest kit utilitza la reacció de reducció catalitzada per la deshidrogenasa. Els agents reductors o antioxidants que puguin interferir amb l'assaig s'han d'eliminar de les mostres a provar.

2. Es recomana fer un preexperiment per explorar el nombre de cèl·lules inoculades i el temps d'incubació després d'afegir la solució CCK-8 més. Pot ser que els leucòcits hagin de ser cultivats durant un període de temps més llarg.

3. Si no hi ha un filtre de 450 nm disponible, es pot utilitzar un filtre amb absorbància entre 430-490 nm, però 450 nm té la sensibilitat de detecció més alta.

4. L'absorbància del vermell de fenol al medi es pot eliminar restant l'absorbància del fons del pou en blanc durant el càlcul, de manera que no afectarà la detecció.

5. Les bombolles d'aire dels pous s'han d'eliminar abans de la mesura de l'absorbància.

6. Per a la vostra seguretat i salut, feu servir ulleres de seguretat, guants o roba protectora.

Només per a ús de recerca!

Etiquetes populars: kit de recompte de cèl·lules-8 més, kit de recompte de cèl·lules de la Xina-8 més fabricants, proveïdors, fàbrica