IF750-Tiramida

L'amplificació del senyal de tiramida (TSA) és un tipus de mètode de detecció enzimàtic que utilitza HRP per realitzar un marcatge in situ d'alta densitat d'antígens diana i es pot aplicar a l'amplificació del senyal d'IF/IHC. Els principis principals de la tecnologia TSA: En presència de peròxid d'hidrogen H2O2, la peroxidasa de rave picant HRP pot catalitzar la tiramina com a intermedi de curta durada molt actiu. En un curt període de temps, l'intermedi pot unir-se covalentment a la superfície rica en electrons de les proteïnes circumdants per formar un complex de tiramina, i un gran nombre de cúmuls rics com "illa" s'integren amb l'enzim com a centre. Es va dipositar una gran quantitat de luciferina al lloc d'unió antigen-anticossos per aconseguir l'amplificació del senyal.

La tècnica TSA es pot utilitzar per detectar objectius de baixa abundància que no es poden detectar amb mètodes convencionals. La tecnologia d'amplificació del senyal basada en tiramina pot proporcionar una sensibilitat extremadament alta i detectar quantitats molt petites d'antígens diana. La tecnologia TSA redueix molt la quantitat d'anticossos i estalvia anticossos, i es pot utilitzar en combinació amb mètodes de tinció convencionals per a imatges multicolors, o es poden realitzar seqüencialment dues o més reaccions de tiramina per etiquetar diferents dianes en una mostra, de manera que la tinció de fluorescència múltiple es pot aconseguir amb l'etiquetatge repetit de diferents tiramines fluorescents

Condicions d'emmagatzematge i manipulació

Packs de gel humit per al transport, emmagatzemar a -20 grau durant 12 mesos.

Nota:

1. Després de fondre's a temperatura ambient, el tub es centrifuga un temps abans d'utilitzar-lo.

2. En comparació amb els anticossos secundaris fluorescents, el kit TSA té una sensibilitat més alta i un senyal més fort. Per tant, s'ha de reduir la concentració d'anticossos primaris, generalment expandint-se 5-10 vegades sobre la base de la proporció de dilució recomanada al manual d'anticossos per reduir la fluorescència de fons causada per la unió no específica. Es recomana establir una concentració de gradient de resistència per obtenir els millors resultats.

3. Si la fluorescència de fons és forta, es recomana augmentar el pas d'extinció de l'autofluorescència dels teixits.

4. La proporció de dilució recomanada de la tiramida fluorescent és 1:500, i la relació de dilució es pot ajustar segons els resultats experimentals (l'interval de relació de dilució recomanada és 1:200-1:1000).

5. El diluent l'has de preparar tu mateix, 1 × TBST (es recomana G0004) que contingui 0,003% d'H2O2. 1×TBST (recomanat G0004) 100 ml, afegir 100 μL 3% H2O2, barrejar bé. El diluent és fàcil de fallar, per la qual cosa es recomana utilitzar-lo ara.

6. Si es realitza un marcatge fluorescent múltiple, es recomana incubar primer anticossos policlonals i després anticossos monoclonals. Primer s'incuba l'anticossos corresponent a la proteïna objectiu d'alta abundància i després s'incuba l'anticòs corresponent a la proteïna objectiu de baixa abundància. Per obtenir passos específics d'operació, consulteu el nostre kit de tenyit multietiqueta fluorescent TSAPLus (1-7 etiquetes, 2-8 fluorescència de color) (G1226, G1236, G1255, G1256, G1257, G1259).

7. Utilitzeu una bata de laboratori i guants d'un sol ús durant el funcionament.

8. Segons el mapa de fonts de llum del sistema d'imatge de fluorescència, es poden seleccionar diferents combinacions de colorants fluorescents per dur a terme el multietiquetatge de fluorescència TSA.

Només per a ús de recerca!

Etiquetes populars: if750-tiramida, Xina if750-fabricants, proveïdors, fàbrica de tiramida