Líquid de tinció de peròxid d'hidrogen vegetal (DAB)

Els teixits vegetals produeixen una varietat d'espècies reactives d'oxigen (ROS) en condicions d'estrès. L'activitat de les ROS és molt gran i extremadament inestable, de manera que la detecció de les ROS normalment depèn dels seus productes finals. El peròxid d'hidrogen és un tipus d'espècie reactiva d'oxigen. Catalitzat per la catalasa, el peròxid d'hidrogen pot reaccionar ràpidament amb el DAB (3, 3-tetraclorhidrat de diaminobenzidina) per formar un compost vermell marró, per tal de localitzar peròxid d'hidrogen als teixits. Segons el principi bàsic, també s'anomena mètode DAB. D'acord amb el principi anterior, aquest producte s'utilitza per a la tinció de peròxid d'hidrogen als teixits vius de les plantes. Generalment s'aplica a les puntes d'arrel tendres, fulles i altres tincions generals, després de tacar el lloc d'acumulació de peròxid d'hidrogen és de color marró a marró fosc.

transport de gel humit; Botiga a 2-8 grau , vàlid durant 12 mesos.

1. Preparació del reactiu: 100 mg de DAB es van dissoldre completament en 100 ml de tampó fosfat per obtenir la solució de treball de tinció de DAB, que es va emmagatzemar a 4 graus sota llum i efectiva en una setmana. Nota: DAB és sensible a la llum i s'ha de protegir de la llum durant el procés de dissolució. Si és difícil de dissoldre, la dissolució es pot promoure mitjançant l'agitació ultrasònica i magnètica.

2. Recolliu les plàntules o puntes d'arrel de les plantes sota estrès (com ara metalls pesants), renteu-les lleugerament amb aigua pura i poseu-les sobre paper de filtre per drenar l'excés d'aigua. Les plàntules de les plantes o les puntes de les arrels es van submergir en una solució de colorant de treball amb tinció DAB a temperatura ambient i es van mantenir allunyades de la llum durant 2-6 h fins que la part positiva va semblar marró fosc, i la resta de les parts eren gairebé incolores o mostraven el color de la planta. mateix. (Ajusta el temps de tenyit segons el grau de joventut i desenvolupament del color de les plantes)

3. Traieu amb cura les plàntules o les fulles de les plantes amb unes pinces, submergiu-les en aigua pura i esbandiu-les 3-5 vegades d'anada i tornada, poseu-les sobre paper de filtre per eliminar l'excés d'aigua i, a continuació, submergiu-les en etanol al 95%. a 40 graus durant 3-16 h. L'objectiu és eliminar la clorofil·la de les plàntules o fulles de les plantes, i l'etanol fresc al 95% es pot substituir moltes vegades durant la decoloració.

4. Traieu les plàntules o les fulles amb unes pinces, submergiu-les en aigua pura i esbandiu-les 3-5 vegades, poseu-les sobre paper de filtre per eliminar l'excés d'aigua, transferiu les mostres a una quantitat adequada de mostra DAB. solució de conservació i remulleu-los durant 30 minuts, després feu fotos. Les mostres es poden emmagatzemar a la solució a temperatura ambient durant una setmana.

1. Després de preparar la solució de treball de tinció DAB, s'ha d'emmagatzemar a 4 graus i mantenir-la lluny de la llum i utilitzar-la en una setmana. El temps d'emmagatzematge és massa llarg, afectarà el color.

2. Com que el peròxid d'hidrogen és fàcil de descompondre i qualsevol factor extern pot estimular l'estrès de les plantes per produir peròxid d'hidrogen, les mostres de plantes s'han de recollir fresques i tacar-les tan aviat com sigui possible. Es recomana un grup de control en blanc negatiu i positiu.

3. Feu fotos tan aviat com sigui possible per desar els resultats després de la tinció de la mostra.

4. Utilitzeu una bata de laboratori i guants d'un sol ús durant el funcionament.

Només per a ús de recerca!

Etiquetes populars: Líquid de tinció de peròxid d'hidrogen de plantes (dab), fabricants, proveïdors, fàbrica de líquids de tinció de peròxid d'hidrogen de la Xina (dab)